Hippocampal neurons jumbo tygkasse

Fördelning av hippocampal neurons som uttrycker EGFP från tillskyndaren Nr4a1/Nur77 (Tg (Nr4a1-EGFP) GY139Gsat, www.gensat.org) colabelled med calbindin röd 28K (, Millipore, 1:200) och befläckt med DAPI (blått) för att visa celllagrar. EGFP-uttryckt förstärktes med fegt anti-GFP (Abcam, 1:2000). Calbindin 28K markerar den hippocampal interneuroncellen förkroppsligar och några pyramidal celler i cornusamonus (CA)regionerna men märker också de mossy fiberprojektionerna från de dentate partikelcellerna till CA3. Nr4a1-EGFP uttrycks i första hand av pyramidal celler CA1 och till en lesser grad i pyramidal celler CA3 och glesa celler i den dentate gyrusen. Är pyramidal dendrites för cell CA1 framstående i stratumradiatumstunder som den täta plexusen är också närvarande i stratumlacunosummolecularen. Dela upp (40 um) monterades med Fluoromount G och avbildades med en 5X, 0,15 mål för NA Achroplan på ett Zeiss Axiovert mikroskop. AF568 var upphetsad på 562/40 nm, och utsläpp som samlas på 624/40 nm med Semrock, filtrerar och ett dichroic singelmusikband (reflekterad 530-585 nm, överförd 601-800 nm). AF488 var upphetsad på 482/35 nm, och utsläpp som samlas på 536/40 nm med Semrock, filtrerar och ett dichroic singelmusikband (reflekterad 446-499 nm, överförd 513-735 nm). DAPI var upphetsad på 350/50 nm och utsläpp som samlades på 460/50 nm med en dichroic CLP400 (Chroma). Singelbilder fångades för varje kanaliserar genom att använda en Zeiss Axiocam HERR CCD och pseudo-färgat genom att använda Axiovision. Linjär bakgrundssubtraktion användes på framlagd avbildar. Se Davis och Puhl (2011), Pubmed legitimation 21305052 för ett specificerat befläckaprotokoll och bilder av EGFP-uttryckt i striatumen i detta anstränger. Detta avbildar är delen av en serie som karakteriserar EGFP-uttryck från alltigenom för tillskyndaren Nr4a1 hjärnan.