Hippocampal neuron 3 nyckelring

Distribution av hippocampal neurons som uttrycker EGFP från den hämmare av tetracykliskt ursprung (Tg(Nr4a1-EGFP)GY139Gsat, www.gensat.org) i hippocampal CA1 som är märkt för den vesikulära glutamattransportören (VGluT1, rött, inbjuden polyklonal, 1:100 0) och nedfläckad med DAPI (blått) för att visa cellens lagrar. EGFP-uttrycket förstärktes med kyckling anti-GFP (Abcam, 1:2000). VGluT1-etiketter excitatoriska terminaler som synapserar i det molekylära lagrar i dentatgyrus, mossfiberterminaler i CA3 och dendritiskt fält i pyramidalcellerna i stratumorien och stratum radiatum. Nr4a1-EGFP uttrycks i hög grad av CA1 pyramidala celler och i mindre utsträckning i CA3 pyramidala celler med gnistceller i dentatgyrus (se associerad bilder). Avsnitt (40 um, sagittal) monterades med Fluoromount G och bildades med ett 5X 0,15 NA-mål på ett Zeiss Axiovert-mikroskop. AF568 var exciterad vid 562/40 nm och utsläpp insamlade vid 624/40 nm med stenfilter och ett enkelt banddikrok (530-585 nm reflekterat, 601-800 nm överfört). AF488 var exciterad vid 482/35 nm och utsläpp insamlade vid 536/40 nm med stenfilter och ett enkelt banddikrok (446-499 nm reflekterat, 513-735 nm överfört). DAPI var upphetsat vid 350/50 nm och utsläpp insamlade vid 460/50 nm med en CLP400-dikroma (kroma). Enkelt bilder fångades för varje kanal med hjälp av en Zeiss Axiocam MR. CCD och pseudo-färgad med hjälp av Axiovision. Linjär bakgrundsubtraktion användes på den presenterade bilden. Se Davis and Puhl (2011), Pubmed ID 21305052, för ett detaljerat färgningsprotokoll och bilder för EGFP-uttryck i striatum och amygdala i denna stam. Den här bilden är en del av en serie som karakteriserar EGFP-uttryck från tetofabildspromotorn Nr4a1 i hela hjärnan.