Interneuron 6 underlägg

Fördelning av interneurons som uttrycker EGFP från tillskyndaren för receptoren 5HT3 (Tg (Htr3a-EGFP) DH30Gsat, www.gensat.org) i den rygg- hippocampusen colabelled för receptoren för cannabinoid CB1 (red) och counterstained med DAPI (blått) för att visa celllagrarna. EGFP-uttryckt förstärktes med fegt anti-GFP (Abcam, 1:2000); cellen förkroppsligar, och fibrer är den närvarande alltigenom alla lagrar av hippocampusen men som berikar i hilus- och stratumlacunosummolecularen (se tillhörande bilder). Immunoreactivityen CB1 (den polyclonal 1:200 för kanin L15, K. Mackie) är framstående i terminalerna av basketceller som synapsing i det pyramidal celllagrar. CB1 berikas också i axons med distinkt styrkor i det inre och yttre molekylära lagrar av den dentate gyrusen. CBimmunoreactivityen är också närvarande i stratumradiatumen och stratumlacunosummolecularen. Dela upp (40 um) monterades med Fluoromount G och avbildades med en 5X, 0,15 mål för NA Achroplan på ett Zeiss Axiovert mikroskop. AF568 var upphetsad på 562/40 nm, och utsläpp som samlas på 624/40 nm med Semrock, filtrerar och ett dichroic singelmusikband (reflekterad 530-585 nm, överförd 601-800 nm). AF488 var upphetsad på 482/35 nm, och utsläpp som samlas på 536/40 nm med Semrock, filtrerar och ett dichroic singelmusikband (reflekterad 446-499 nm, överförd 513-735 nm). DAPI var upphetsad på 350/50 nm och utsläpp som samlades på 460/50 nm med en dichroic CLP400 (Chroma). Singelbilder fångades för varje kanaliserar genom att använda en Zeiss Axiocam HERR CCD och pseudo-färgat genom att använda Axiovision. Linjär bakgrundssubtraktion användes på framlagd avbildar. Se Davis och Puhl 2011 (Pubmed legitimation 21305052) för ett specificerat befläckaprotokoll. Detta avbildar är delen av en serie som karakteriserar EGFP-uttryck från alltigenom för tillskyndaren 5HT3 hjärnan.